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實(shí)現(xiàn)ATP熒光檢測儀方法的三大要素

發(fā)布日期:2016-11-23點(diǎn)擊次數(shù):2417

ATP熒光檢測法能在十幾秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)檢測,它大大提升了傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法24-48小時的工作效率,ATP方法的實(shí)現(xiàn)包括儀器、試劑和如何使用三大要素。

1、儀器
當(dāng)儀器和試劑配合使用,整體靈敏度達(dá)到10-15~10-18摩爾ATP范圍時,可以用于食品表明微生物檢測、手衛(wèi)生檢測、餐飲器具潔凈度檢測、重點(diǎn)科室和重要活動場所(如奧運(yùn)會、世博會、人大政協(xié)會議等)物表檢測和衛(wèi)生安保、食品加工器具、工作臺等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結(jié)果檢測、醫(yī)療環(huán)境工作平臺(器械表面、內(nèi)窺鏡、空調(diào)進(jìn)出氣口)衛(wèi)生學(xué)即時評估,其實(shí)時監(jiān)測數(shù)據(jù)能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求;當(dāng)儀器和試劑配合使用,整體靈敏度達(dá)到10-17-10-19摩爾ATP范圍時,可用于更高要求的檢測如復(fù)用醫(yī)療器械清洗效果后評估和二次清潔處理評價、醫(yī)療用水檢測等。當(dāng)然目前國外ATP設(shè)備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標(biāo)——可檢測到10-15~10-18摩爾水平的ATP努力,檢測試劑也可達(dá)到5個細(xì)菌細(xì)胞的水平。
 
2、如何使用、取樣
這是影響性和一致性的關(guān)鍵之一,可按照<<醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)附錄A(規(guī)范性附錄)采樣及檢查方法>>等規(guī)范要求再參照生物手持式ATP生物熒光檢測儀使用說明書采樣、檢測、計算得出結(jié)果并記錄報告。采樣:(面積類)將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來回涂擦個兩次(一只手涂擦面積約30cm2),并隨之轉(zhuǎn)動采樣拭子。(體積類)將ATP拭子采樣棒一支在待測液體充分浸濕。檢測:將拭子放入手持ATP儀,獲得被測樣本與細(xì)菌污染程度相對應(yīng)的ATP生物熒光值,得出菌落數(shù)指標(biāo)(詳見下文操作步驟及定標(biāo)評價)。另外天隆牌ATP儀自帶的 軟件能自動將ATP熒光值儲存、處理和傳輸。
 
3、結(jié)果判讀
以上取樣、檢測全過程在1分鐘之內(nèi)快速完成,比起24-48小時的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)勢巨大。細(xì)菌數(shù)量與細(xì)菌內(nèi)所含ATP量有明確的相關(guān)性,通過檢測ATP含量可間接得出細(xì)菌數(shù)量,即ATP熒光檢測儀檢測結(jié)果顯示的發(fā)光值——相對照度單位RLU讀數(shù)與常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果菌落數(shù)CFU具有很高的相關(guān)性,兩者沒有統(tǒng)計上的顯著差異,因此這也是ATP熒光法細(xì)菌檢測的理論基礎(chǔ)。
ATP生物熒光檢測儀利用生物化學(xué)發(fā)光技術(shù)將不可見的ATP濃度變?yōu)榭梢姽廨敵?,從而以定量的結(jié)果間接顯示微生物數(shù)量,數(shù)值位于0-9999之間,以相對光單位RLUs表示。1RLUs約等于1fmol的ATP。RLU讀數(shù)可以與用戶設(shè)定的限值范圍相比較,提供的檢測。